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利用锌指核酸酶敲除绵羊肌肉抑制素基因的方法

来源:科管处 发布时间:2017-02-04

专利号:ZL201310159422.9

类 别:国家发明专利

申请(专利权)人:新疆维吾尔自治区畜牧科学院中国-澳大利亚绵羊育种研究中心;

发明人:刘明军;张雪梅;李文蓉;张宁;贺三刚;刘晨曦;玛依拉;

简介:本发明公开了一种锌指核酸酶定点删除绵羊肌肉抑制素基因的方法,其针对绵羊Myostatin基因外显子3设计了识别39bp的特异靶位点序列,并构建锌指核酸酶质粒,将该质粒转染绵羊成纤维细胞,获得可以定点删除95bp和113bp的双等位基因删除的单克隆细胞,表明锌指核酸酶定点删除Myostatin基因特异靶位点序列能够准确删除Myostatin基因外显子3并能准确分选出Myostatin基因被定点删除的细胞,证实了该序列的有效性,且获得删除的单克隆细胞无需抗生素筛选,兼顾了基因组靶向修饰和安全性两大优点,对培育无抗性标记基因、安全高效的转基因绵羊具有重要意义。