记录ID： 100000006410978

类别：专利

标题： 一种用于绵羊胚胎干细胞的无血清分离培养方法

摘要： 本发明提供的一种用于绵羊胚胎干细胞的无血清分离培养方法，将体外培养的绵羊囊胚，采用Tyrode’sSolution去除透明带后，接种于绵羊胚胎干细胞无血清培养液中，并用针头固定，置于38.6℃、5％CO2饱和湿度条件下培养，培养中每48小时半量更换培养液，pH为6.8-7.2，原代培养7-9天；之后每3-4天采用常规机械法按1∶2-1∶4传代一次，即绵羊胚胎干细胞体外培养可传至16代。绵羊胚胎干细胞无血清培养液的配制：D-MEM/F-12+80ng/mLbFGF+3μ MCHIR99021+10μ L/mL N2+20μ L/mL B27+10μ L/mLNEAA+2mML-Glutamine+0.2mMβ -Mercaptoethanol。使用32号针头将裸胚固定于培养皿底部，避免损伤囊胚内细胞团并将裸胚滋养层细胞剥离。裸胚接种数量因以45-60枚/组为宜。该方法能使绵羊的胚胎干细胞原代集落形成率提高至33％(14/42)。

作者：黄俊成, 赵云程, 汪立芹,林嘉鹏, 陈童,陈世彬

申请（专利）号： CN201010100107.5

申请日期： 2010/1/22

专利类别：实用新型

城市： 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市克拉玛依东路151号    830000

（文章摘自：中国知识产权网）