记录ID： 100000006410982

类别：专利

标题： 幼畜卵母细胞体外两次受精方法

摘要： 本发明提供的幼畜卵母细胞体外两次受精方法，受体均为45-100日龄母幼畜，经FSH超数排卵处理，取卵母细胞100枚/只以上待用；将体外成熟25-26小时的卵母细胞与精子混合，完成一次体外受精；5-6小时进行二次体外受精，过13-14小时，移于培养板培养，48小时后统计卵裂率即可。成熟的卵母细胞需用0.1％的透明质酸酶处理30-60s，经吹吸脱去部分卵丘细胞，加入2-5小时平衡好的50-70μ l/滴的受精液内孵育；水浴解冻精液，放入CO2箱，20-25分钟，取上清液离心2-5分钟，沉淀的精子按2-4×106个/ml的密度加入受精液孵育；将受精5-6小时的卵取出，放入受精液中；用同前的方法解冻精子，加入受精液，经13-14小时，洗涤，移入平衡好的500μ l/孔的四孔培养板内培养。该方法简单易行，能使牛、羊的幼畜受精率达到80-92％，囊胚率达到40-50％。

作者：郭志勤, 汪立芹,杨梅, 吴伟伟, 陈童

申请（专利）号： CN200910113465.7

申请日期： 2009/9/25

专利类别：实用新型

城市： 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市克拉玛依东街151号    830000

（文章摘自：中国知识产权网）