记录ID: 100000006410983
类别:专利
标题: 一种用于卵周隙内注射慢病毒生产转基因羊的方法
摘要: 本发明提供一种用于卵周隙内注射慢病毒生产转基因羊的方法,将慢病毒载体与病毒包装质粒共转染为293T细胞,至48小时后离心,得慢病毒的浓缩液,将其注射于成熟24-25小时的卵母细胞卵周隙内,与精子结合实施体外受精,12小时后置于培养液中培养,48小时后统计卵裂率和转基因率。其一取卵母细胞用体外成熟液洗涤3-4次,按25-30枚/滴入体积75-78μ l/滴的体外成熟培养液,在5%CO2、95%下培养;其二体外成熟的卵母细胞脱去卵丘细胞,慢病毒注射入细胞卵周隙内,用体外受精液洗涤2-4次,按25-30枚/滴入受精液内;解冻精液,移入受精液,离心弃上清液,沉淀精子加受精液滴,孵育;取受精12-18小时的卵,按上步处理后入四孔培养板内培养即可;其三为药剂慢病毒液、抽卵液、成熟液、显微操作液、SOF、受精液、培养液、养血清的必备。
作者:黄俊成, 汪立芹,刘明军, 赵云程, 陈童,林嘉鹏, 王静
申请(专利)号: CN200910113566.4
申请日期: 2009/12/8
专利类别:实用新型
城市: 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市克拉玛依东街151号 830000
(文章摘自:中国知识产权网)