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从牛初乳中分离乳腺上皮细胞的体外培养方法

来源: 发布时间:2011-09-14

记录ID: 100000006410992

类别:专利

标题: 从牛初乳中分离乳腺上皮细胞的体外培养方法

摘要: 本发明公开了一种从牛初乳中分离乳腺上皮细胞的体外培养方法。针对目前乳腺上皮细胞体外培养方法中存在的组织取材不易、培养成功率低等问题,我们采用从泌乳2-7天的牛初乳中分离培养乳腺上皮细胞,进行原代培养。培养液为:RPMI-1640,添加胎牛血清20%、胰岛素1μ g/ml、醋酸钠5mM、转铁蛋白10μ g/ml、青霉素100U/ml、链霉素100μ g/ml等,培养条件为37℃,5%CO2。细胞接种在胶原包被的培养瓶内,经过15-18天培养,细胞可铺满瓶子底壁,并可传代。用角蛋白-18抗体对所培养细胞进行免疫组化鉴定,结果呈阳性,证明所培养细胞系确为乳腺上皮细胞。用ELLISA和RT-PCR方法从原代培养的牛乳腺上皮细胞中均检测到了β -酪蛋白,表明所培养的乳腺上皮细胞具有泌乳功能,可用于多种体外研究。

作者:李文蓉, 谭立新, 牛志刚

申请(专利)号: CN200810072887.X

申请日期: 2008/5/26

专利类别:发明专利

城市: 新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市克拉玛依东街151号    830000

(文章摘自:中国知识产权网)