1.特点特性：《布鲁氏菌种型鉴定的AMOS-PCR方法》由自治区高新技术项目资金资助完成。本方法可对家畜布鲁氏菌病进行诊断，对感染家畜的布鲁氏菌进一步进行鉴定，即应用布鲁氏菌种型鉴定的AMOS-PCR方法一步就可对布鲁氏菌牛种、羊种、猪种、犬种区分鉴别，可用于家畜布鲁氏菌感染病原，如牛、羊、绵羊附睾、猪、犬种共5个种的种型鉴定，并可区分疫苗（S19、RB51）株和野毒株。
2.技术要点：按下表设计引物
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引物名称 |
引物序列 |
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AMOS-（A1） |
5’-gAC gAA Cgg AAT TTT TCC AAT CCC-3’ |
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AMOS-（M） |
5’-AAA TCg CgT CCT TgC Tgg TCT gA-3’ |
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AMOS-（O） |
5’-Cgg gTT CTg gCA CCA TCg TCg-3’ |
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AMOS-（S） |
5’-gCg Cgg TTT TCT gAA ggT TCA gg-3’ |
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AMOS-（A2） |
5’-gCg CAg CgT TgC ggC AAT Tg-3’ |
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AMOS-（IS711） |
5’-Tgc CgA TCA CTT AAg ggC CTT CAT-3’ |
PCR反应体系：AMOS缓冲液8μl，1.5μl 50mmol/L MgCl2，1.25μl 10mmol/L dNTP，引物浓度均25μmol/L，1μl AMOS-（A），1.5μl AMOS-（M），1.5μl AMOS-（O），1μl AMOS-（S），1μl AMOS-（A2），2μl AMOS-（IS711），2.5U Taq酶0.5μl，DNA模板2μl，H2O补至50μl。PCR反应程序：94℃5min；94℃1min，60℃1.5min，72℃10min，40个循环；72℃延伸10min，其余步骤按常规方法进行操作。
3.推广前景：主要用于疑似家畜的布鲁氏菌病病原种型的鉴定，如布鲁氏菌牛种、羊种、猪种、犬种等。该方法可快速、安全地应用于布鲁氏菌病病原的种型鉴定。
4.适宜地区：该方法可用于全国各地的家畜布鲁氏菌病病原的种型鉴定，可用于所有实验室的布鲁氏菌种型的鉴别。
